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不锈钢网过滤法分离提取多核巨细胞方法的应用

作者:叶片过滤机 来源:http://www.applel.net 日期:2012/6/10 8:42:47 人气: 标签:不锈钢网
内容提示:正骨巨细胞瘤(giantcelltumorofbone,GCT)是一种以多核巨细胞和单核基质细胞组成的常见骨肿瘤,在GCT中,多核巨细胞的存在,始终是该肿瘤的典型组织学特征之一.尽管在GCT的众多研究中发现,GCT中的多核巨细胞可能就是肿瘤…

正骨巨细胞瘤(giant cell tumor of bone,GCT)是一种以多核巨细胞和单核基质细胞组成的常见骨肿瘤,在GCT中,多核巨细胞的存在,始终是该肿瘤的典型组织学特征之一.尽管在GCT的众多研究中发现,GCT中的多核巨细胞可能就是肿瘤环境中的破骨细胞[1~3],并可直接引起骨质的溶解[4,5].但一直未能找到一种有效的方法从GCT中提取高纯度的多核巨细胞,以供体外实验研究.1997年我们在完成国家教委博士点基金和霍英东教育基金课题"骨巨细胞瘤病变部位局部骨质吸收机制"的研究中[6,7],先后尝试运用了percoll密度梯离心法和50μm孔经不锈钢网过滤法,从GCT组织中提取多核巨细胞.结果证实,不锈钢网过滤法确为一种简便、经济而高效的分离提纯方法,值得介绍和推广.

巨细胞瘤(giantcelltUmorofbone,1.门例骨巨细胞瘤手术标本取自中山医科GCT)是一种以多核巨细胞和单核基质细胞组大学第一附属医院骨科,病理分级均为Ill级。成的常见骨肿瘤,在GCT中,多核巨细胞的2.分离用品:50卜m孔径的不锈钢网(河存在,始终是该肿瘤的典型组织学特征之一。北筛网厂生产),Percoll试剂(Sigma公司生尽管在GCT的众多研究中发现,GCT中的多产),胶原酶(Sigma公司生产),CYTOSPffo核巨细胞可能就是肿瘤环境中的破骨细胞l‘-’],2离心机(Shandon公司生产)。井可直接引起骨质的溶解卜”。但一直未能找到二、方法一种有效的方法从GCT中提取高纯度的多核1.GCT瘤细胞悬液制备:在无菌条件下,巨细胞,以供体外实验研究。1997年我们在完用剪刀将3g的瘤组织剪成0二3mm’l.3mm’成国家教委博士点基金和霍英东教育基金课题大小碎块,用5倍浓度双抗(含青霉素500U/ml”骨巨细胞瘤病变部位局部骨质吸收机制”的研和链霉素500pg/ml)yJH8nkS液反复洗涤除究中l‘’],先后尝试运用了percoll密度梯离心去血液。

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